Eficiência de duas técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães e avaliação seminal pós-criopreservação / [Efficiency of two techniques for recovering epididymal spermatozoids from dogs and seminal evaluation post cryopreservation]

O objetivo deste trabalho foi avaliar a recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, utilizando as técnicas de fluxo retrógrado (FR) e flutuação (FL) em diluidor Tris-gema, antes e após a criopreservação. Foram coletados 30 complexos testículo-epididímos (CTE), sendo 15 para FR e 15 para FL, e, logo após a recuperação dos espermatozoides, foram analisadas as alterações morfológicas nessas células espermáticas. Após a adição do diluidor, foram avaliados os parâmetros de motilidade total (MOT) e vigor (V) espermáticos. O sêmen pós-criopreservado foi submetido ao teste de termorresistência nos tempos T0, T30, T60 e T90 minutos, além da avaliação das membranas plasmática e acrossomal por sondas fluorescentes. Não houve diferença estatística entre as técnicas quanto à MOT e ao vigor no sêmen diluído (FR-MOT: 82,3% e V: 3,4; FL-MOT: 79,6% e V: 3,2) e pós-criopreservado (FR-MOT: 34% e V: 2,8; FL-MOT: 30% e V: 2,7). A partir do T30, houve diferença significativa quanto à MOT e ao vigor nas técnicas utilizadas, e o tempo também prejudicou o acrossoma espermático a partir do T30. Conclui-se que as técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, testadas neste trabalho, podem ser utilizadas para refrigeração e criopreservação de sêmen.(AU)

The objective of this work was to evaluate the recovery of epididymal spermatozoa from castrated dogs using retrograde flow (FL) and flotation (FL) techniques in Tris-egg yolk diluent, before and after cryopreservation. Thirty testicle-epididymal complexes (CTE) were collected, 15 for FR and 15 for FL and soon after spermatozoid recovery, morphological changes in these spermatic cells were analyzed. After addition of the diluent, the parameters of total motility (MOT) and vigor (V) were evaluated. The post-cryopreserved semen was submitted to thermoresistance (TTR) test at T0, T30, T60 and T90 minutes, as well as the plasma and acrosomal membrane evaluation by fluorescent probes. There was no statistically significant difference between techniques tested for MOT and vigor in the diluted semen (FR-MOT: 82.3% and V: 3.4, FL-MOT: 79.6% and V: 3.2) and post-cryopreserved (FR-MOT: 34% and V: 2.8, FL-MOT: 30% and V: 2.7). From the T30 there was a significant difference regarding MOT and vigor in the used techniques, and the time also damaged the spermatic acrosome from the T30. It is concluded that the epididymal spermatozoa recovering techniques from castrated dogs, tested in this study, can be used for semen refrigeration and cryopreservation.(AU)

Hematological and biochemical parameters in Spotted Paca (Cuniculus paca) undergoing pharmacological restraint and general anesthesia / Parâmetros hematológicos e bioquímicos em Cuniculus paca sob contenção química e anesthesia geral

The aim of this study was to assess the effects of chemical restraint, general anesthesia and opioid treatment on hematological components in Cuniculus paca. Eight healthy, adult, captivity female animals , underwent three laparoscopic procedures with a 15-day interval were evaluated. After physical restraint, an association of ketamine (25mg/kg) and midazolam (0.5mg/kg) was administered intramuscularly for chemical restraint. Posteriorly, anesthesia was induced and maintained with isoflurane; and randomly administered methadone (0.5mg/kg), tramadol (5mg/kg) or saline-placebo (0,1mL/kg) intramuscularly. After pharmacological restraint and in the final laparoscopy stage, venous blood samples were obtained for complete blood count, total plasma protein (TP), creatinine, alanine aminotransferase (ALT), sodium, potassium, chloride and ionized calcium analysis. During general anesthesia, hemoglobin, TP concentration and lymphocytes decreased (P=0.029; <0.001; 0.022 respectively), whereas the potassium levels increased (P=0.034). In conclusion, chemical restraint with ketamine/midazolam association causes a slight decrease in blood cellular components. Isoflurane anesthesia for laparoscopic procedure lead to decrease in hemoglobin, lymphocytes and protein concentrations, while potassium increased, without any influence from the tramadol or methadone treatment. However, these alterations were transient, and its hematologic values can collaborate in carrying out epidemiological, pathophysiological or case studies in the Cuniculus paca.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos de contenção química, anestesia geral e tratamento com opiáceos nos parâmetros hematológicos em Cuniculus paca. Foram avaliados oito animais saudáveis, fêmeas, adultas, de cativeiro, que foram submetidas a três procedimentos laparoscópicos, com intervalo de 15 dias. Após a contenção física, uma associação de cetamina (25mg/kg) e midazolam (0,5mg/kg) foi administrada por via intramuscular para contenção química. Posteriormente, a anestesia foi induzida e mantida com isoflurano, e administrou-se aleatoriamente metadona (0,5mg/kg), tramadol (5mg/kg) ou placebo salina por via intramuscular. Após a contenção farmacológica e em estágio final da laparoscopia, foram obtidas amostras de sangue venoso para contagem sanguínea completa, proteína de plasma total (TP), creatinina, alanina aminotransferase (ALT), cálcio, sódio, potássio e cloreto ionizado. Durante a anestesia geral, a concentração de hemoglobina, TP e linfócitos diminuiu (P= 0,029;< 0,001; 0,022, respectivamente), enquanto os níveis de potássio aumentaram (P= 0,034). Em conclusão, a contenção química com associação de cetamina/midazolam promove uma ligeira diminuição dos componentes celulares do sangue. A anestesia com isoflavano para o procedimento laparoscópico levou a uma diminuição das concentrações de hemoglobina, linfócitos e proteínas, enquanto o potássio aumentou, sem qualquer influência do tratamento com tramadol ou metadona. No entanto, essas alterações foram transitórias, e os seus valores hematológicos obtidos podem colaborar na realização de estudos epidemiológicos, fisiopatológicos ou casuísticas para Cuniculus paca.(AU)

Comparison of two surgical approaches for Laparoscopic Ovum Pick Up in Ewes / Comparação de duas abordagens cirúrgicas para aspiração folicular laparoscópica em ovelhas

The present study had as an aim to evaluate a right lateral access as an alternative method to laparoscopic ovum pick-up (LOPU) in sheep. Twenty-four Santa Ines ewes were randomly assigned in two groups with twelve animals each: RLD - positioned in right lateral decubitus, with 10º head-down tilt; and DD - positioned in dorsal decubitus with 35º head-down tilt. The following parameters were evaluated every 10 minutes during the procedure: total surgical time (ST), visualized follicles (VF), aspirated follicles (AF), recovered oocytes (RO), mean arterial pressure (MAP), heart rate (HR), respiratory rate (fR) and end tidal CO2 pressure (EtCO2). Pre and postoperative arterial hemogasometry parameters (PaO2, PaCO2, pH, CHCO3 and BE) were also evaluated; and serum fibrinogen levels (SFL) on postoperative period. The values of VF, AF, RO, fR, PaO2, pH, CHCO3, BE and SFL were similar between groups, although ST, HR, MAP, EtCO2 and PaCO2 were higher in LG. Regarding operative periods, PaO2 and pH were lower after surgery (PaO2: 79.1±16.4; 79.2±11.7mmHg; pH: 7.30±0.09; 7.32±0.08) in both groups when compared to preoperative (PaO2: 80.1±14.3; 83.4±10.5 mmHg; pH: 7.38±0.05; 7.39±0.05) while PaCO2 (43.6±4.6; 41.9±5.4mmHg) and CHCO3 (22.8±1.5; 22.7±3.0mmol/L) increased (PaCO2: 54.3±10.9; 46.9±6.3mmHg; CHCO3: 24.8±3.4; 24.4±2.7mmol/L) postoperative. This alternative decubitus presented is a viable procedure and did not differ in oocyte recovery rates in ewes. However, entails cardiorespiratory major alterations compared to conventional procedure, making its practical applicability limited.(AU)

O presente estudo teve como objetivo avaliar o acesso lateral direito como um método alternativo para a recuperação de oócitos por laparoscopia (LOPU) em ovelha. Vinte e quatro ovelhas Santa Inês foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos com 12 animais: grupo RLD - posicionado em decúbito lateral direito, cefalodeclive com 10º de inclinação; grupo DD - posicionado em decúbito dorsal em cefalodeclive, inclinação de 35º. Foram avaliados, a cada 10 minutos, durante o procedimento cirúrgico: tempo total da cirurgia (ST), folículos visualizados (VF), folículos aspirados (AF), oócitos recuperados (RO), pressão arterial média (MAP), frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (fR) e pressão final de CO2 (EtCO2). Também foram avaliados os parâmetros de hemogasometria arterial pré-operatória e pós-operatória (PaO2, PaCO2, pH, CHCO3 e BE), bem como os níveis séricos de fibrinogênio (SFL) no período pós-operatório. Os valores de VF, AF, RO, fR, PaO2, pH, CHCO3, BE e SFL foram semelhantes entre os grupos, embora ST, FC, MAP, EtCO2 e PaCO2 tenham sido maiores em RLD. Os parâmetros PaO2 e pH foram menores após a cirurgia (PaO2: 79,1±16,4; 79,2±11,7mmHg; pH: 7,30±0,09; 7,32±0,08) em ambos os grupos em relação ao momento pré-cirúrgico (PaO2: 80,1±14,3; 83,4±10,5mmHg; pH: 7,38±0,05; 7,39±0,05), enquanto PaCO2 (43,6±4.6; 41,9±5,4mmHg) e CHCO3 (22,8±1,5; 22,7±3.0mmol/L) aumentaram (PaCO2: 54,3±10,9; 46,9±6,3mmHg; CHCO3: 24,8±3,4; 24,4±2,7mmol/L) após a cirurgia. O decúbito lateral é uma alternativa viável para LOPU e não apresenta diferença para a taxa de recuperação oocitária em ovelhas. No entanto, promove alterações cardiorrespiratórias em comparação com o decúbito dorsal, tornando a sua aplicabilidade prática limitada.(AU)

Cardiovascular assessment in Female Spotted Paca ( Cuniculus paca ) / Avaliação cardiovascular em fêmea da Cúciculus paca

Aiming to provide cardiovascular morphophysiology information on the Cuniculus paca, an important neotropical rodent, eight healthy adult females of this species were evaluated three times by echocardiography under general anesthesia with isoflurane every 15 days. The exams were performed by a single experienced evaluator with the animals positioned in right and left decubitus. Posteriorly, two expert evaluators measured the cardiac chambers, walls and flow patterns, by B-mode, M-mode, and Doppler ultrasonography. The resulting values were compared among evaluators and periods by the Bland-Altman agreement test and several descriptive statistics were presented for each parameter. Echocardiographic images were obtained between the second and fifth left and right intercostal spaces, enabling the measurement of heart chambers and walls, mitral, tricuspid, aortic and pulmonary valves blood flows, and the ejection and shortening fractions calculation. None of the studied variables showed inter-observers or inter-periods variations. This study provided some normal echocardiographic variables, applicable to epidemiological, pathophysiological or case studies in the Cuniculus paca and phylogenetically close species.(AU)

Com o objetivo de fornecer informações da morfofisiologia cardiovascular da Cuniculus paca, um importante roedor neotropical, oito fêmeas adultas saudáveis dessa espécie foram avaliadas três vezes pela ecocardiografia, sob anestesia geral com isoflurano, a cada 15 dias. Os exames foram realizados por um único avaliador experiente, com os animais posicionados em decúbito direito e esquerdo. Posteriormente, dois avaliadores experientes mediram as câmaras cardíacas, as paredes e os padrões de fluxo, por meio do modo B, do modo M e da ultrassonografia Doppler. Os valores resultantes foram comparados entre avaliadores e períodos pelo teste de concordância de Bland-Altman, e várias estatísticas descritivas foram apresentadas para cada parâmetro. As imagens ecocardiográficas foram obtidas entre o segundo e o quinto espaços intercostais esquerdo e direito, o que permitiu a medição das câmaras e paredes cardíacas, do fluxo sanguíneo pelas válvulas mitral, tricúspide, aórtica e pulmonar e o cálculo das frações de ejeção e encurtamento. Nenhuma das variáveis estudadas mostrou variações entre os avaliadores ou entre os períodos. Este estudo fornece algumas variáveis ecocardiográficas normais, aplicáveis a estudos epidemiológicos, fisiopatológicos ou de casos na Cuniculus paca e em espécies filogeneticamente próximas.(AU)

Plasminogen activator inhibitor 1 and Antipain preserve acrosome integrity of bovine spermatozoa during cryopreservation / Inibidor do ativador do plasminogênio 1 e antipaína preservam a integridade do acrossoma de espermatozoides bovinos durante a criopreservação

Seminal plasma contains serine proteases and serine protease inhibitor, which are involved in mammalian fertilization, and the inhibitors can be applied to prevent cold-induced sperm capacitation. The effects of different concentrations of two serine protease inhibitors were analyzed, Plasminogen activator inhibitor 1 - PAI-1 (70ƞg, 140ƞg and 210 ƞg) and Antipain (10µg, 50µg and 100µg) as supplementation to bovine semen cryopreservation extender. The effects of the inhibitors on the sperm parameters (sperm kinetics - CASA, acrosome integrity, plasma membrane integrity, mitochondrial membrane potential, sperm defects and acrosome reaction rate) were evaluated in the post-thaw semen. Cryopreservation of sperm with Antipain decreased post-thaw kinetic parameters of MP, VSL, LIN, SRT and the percentage of hyper-activated sperm while PAI-1 (210 ƞg) decreased VSL and LIN. Antipain and PAI-1 had no effect on the integrity parameters of the plasma membrane, mitochondrial membrane potential and sperm defects. Sperm cryopreserved in the presence of Antipain and PAI-1 (70 and 140 ƞg) preserved acrosome integrity, as they were able to complete the in vitro acrosome reaction. In conclusion, the serine protease inhibitors, Antipain and PAI-1 (70 and 140ƞg) are able to preserve the acrosome integrity of cryopreserved bovine sperm.(AU)

A criopreservação é parcialmente prejudicial à fertilidade do sêmen de bovinos e induz mudanças semelhantes à capacitação em espermatozoides. O plasma seminal contém serina-proteases e inibidores de serina-proteases que estão envolvidos na fertilização de mamíferos, e os inibidores podem ser aplicados para evitar uma capacitação espermática induzida pelo frio. Analisaram-se os efeitos de diferentes concentrações de dois inibidores de serina-proteases, inibidor do ativador do plasminogênio 1 - PAI-1 (70ƞg, 140ƞg e 210ƞg) e antipaína (10µg, 50µg e 100µg) na suplementação ao diluidor de criopreservação de sêmen bovino. Trinta e seis ejaculados de quatro bovinos Curraleiro Pé-Duro foram usados para criopreservação. Os efeitos dos inibidores sobre os parâmetros dos espermatozoides (cinética espermática - CASA, integridade acrossomal, integridade da membrana plasmática, potencial de membrana mitocondrial, defeitos espermáticos e taxa de reação acrossomal) foram avaliados no sêmen pós-descongelamento. A criopreservação de espermatozoides com antipaína diminuiu os parâmetros cinéticos pós-descongelamento de MP, VSL, LIN, SRT e a porcentagem de espermatozoides hiperativados, PAI-1 (210ƞg) diminuiu VSL e LIN. Antipaína e PAI-1 não tiveram efeitos nos parâmetros de integridade da membrana plasmática, no potencial de membrana mitocondrial e nos defeitos espermáticos. Espermatozoides criopreservados na presença de antipaína e PAI-1 (70 e 140ƞg) preservaram a integridade acrossomal, assim como foram capazes de completar a reação acrossômica in vitro. Em conclusão, os inibidores de serina-proteases, antipaína e PAI-1 (70 e 140ƞg) são capazes de preservar a integridade acrossomal de espermatozoides criopreservados de bovinos.(AU)

Desempenho e características de carcaça de três genótipos comerciais de frangos de corte alimentados com diferentes dietas / Performance and carcass traits of three commercial broiler genotypes fed different diets

Este estudo teve como objetivo avaliar o desempenho e as características de carcaça de frangos de corte de três genótipos comerciais do nascimento aos 35 dias de idade. Utilizou-se um total de 2.970 pintos de três genótipos de aves comerciais (Cobb 500, Hubbard Flex e Ross 308). Os programas nutricionais foram dieta basal, dieta com 10% mais e 10% menos de aminoácidos do que a dieta basal. As aves foram distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 3x3x2 (genótipo x dieta x sexo), com cinco repetições e 33 aves por unidade experimental. Conversão alimentar, ganho de peso diário, ingestão da dieta e peso corporal aos 35 dias de idade foram registrados. Duas aves de cada unidade experimental foram amostradas e abatidas aos 35 dias de idade para avaliar as seguintes características de carcaça: peso corporal no momento do abate, peso da carcaça e rendimento, e peso e rendimento dos cortes (peito, pernas e asas). Houve uma interação significativa entre o genótipo e sexo para GPD e PC35. Os machos apresentaram melhores desempenhos e características de carcaças do que as fêmeas.(AU)

This study aimed to evaluate performance and carcass traits of three commercial broiler genotypes from hatch to 35 days of age. A total of 2,970 sexed one day old chicks of three commercial broiler genotypes (Cobb 500, Hubbard Flex and Ross 308) were used. The nutritional programs were basal diet, diet with 10% more and 10% less amino acids than the basal diets. Birds were distributed in a completely randomized experimental design in a 3x3x2 (genotype x diet x sex) factorial scheme, with five replicates and 33 birds per experimental unit. Feed conversion, daily weight gain, diet intake and body weight at 35 days of age were recorded. Two birds from each experimental unit were sampled and slaughtered at 35 days of age to evaluate the following carcass traits: slaughter body weight, carcass weight and yield, and main cuts (breast, legs and wings) weight and yield. There was a significant interaction between genotype and sex for ADG and BW35. Males fed basal diets presented higher performance and carcass traits in comparison to females.(AU)

Laparoscopic ovum pick-up in spotted paca (Cuniculus pacas) / Aspiração folicular por laparoscopia em paca (Cuniculus pacas)

The aim of this work is study the laparoscopic ovum pick-up (LapOPU) technique in spotted paca, describing surgery details, complications and oocyte recovery rate. Nine healthy adult non-pregnant captive females were used, in a total of 39 procedures. When the surgical plane of anaesthesia was achieved, the females were positioned at 20º Trendelenburg. Three 6mm trocars were placed on right and left inguinal and hypogastric regions. Abdomen was inflated with CO2 and the intra-abdominal pressure was stablished in 10mmHg. Follicular punctures were performed moving the ovaries with atraumatic forceps. For punctures, an 18-gauge 3.5 inch long needle attached to a vacuum system with pressure not exceeding 65mmHg was used. Oocytes were recovered into 50mL centrifuge tubes with media composed of PBS supplemented with 10 IU/mL of heparin and kept at 36°C. R Software was used for statistical analysis. Data normality distribution (Shapiro test) and variances homoscedasticity (Bartlett test) were tested and descriptive statistics (mean±SD) was used to present the results. It was only possible to perform LapOPU in 30 of 39 laparoscopies (76.92%). The surgical total time was 37.34 ± 18.53 minutes. The total number of visualized follicles, aspirated follicles, and retrieved oocytes were 502, 415, and 155, respectively. And the same parameters per animal were: 14.34 ± 12.23, 11.86 ± 10.03, and 4.43 ± 4.69 respectively. Oocyte recovery rate was 32.56 ± 27.32%. In conclusion, caudal positioning of portals with slight triangulation allows good viewing of the abdominal cavity and eases the manipulation of the ovaries. Thus this described LapOPU technique is feasible in spotted paca and easy to perform.(AU)

Objetiva-se, com este trabalho, estudar a técnica de aspiração folicular por videolaparoscopia (LapOPU) em pacas, descrevendo detalhes do procedimento cirúrgico, complicações e taxa de recuperação oocitária. Para isso, foram utilizadas nove fêmeas, saudáveis, adultas, não gestantes e mantidas em cativeiro, totalizando 39 procedimentos. Quandoo plano anestésico cirúrgico foi alcançado, as fêmeas foram posicionadas em Trendelenburg com 20º de angulação. Três trocáteres foram colocados nas regiões inguinais direita e esquerda e hipogástrica. O Abdômen foi insuflado com CO2, e a pressão intra-abdominal foi mantida em 10mmHg. Punções foliculares foram realizadas manipulando-se os ovários com pinças atraumáticas. Para aspirações foliculares, usou-se agulha de 18G com bisel curto acoplado ao sistema de vácuo com pressão não excedendo 65mmHg. Oócitos foram recuperados em tubos de centrifugação de 50mL contendo meio composto de PBS suplementado com 10UI/mL de heparina e mantidos a 36ºC. Usou-se software R para análise estatística. Testaram-se a distribuição normal dos dados (teste de Shapiro) e a homocedasticidade das variâncias (teste de Barlett) e se usaram estatísticas descritivas (média±DP) para apresentar os resultados. Das 39 videolaparoscopias, só foi possível realizar LapOPUem 30 delas (76,92%). O tempo cirúrgico total das LapOPU foi de 37,34 ± 18,53 minutos. Os números totais de folículos visualizados, folículos aspirados e oócitos recuperados foram: 502, 415 e 155, respectivamente. E os mesmos parâmetros por animal foram: 14,34 ± 12,23, 11,86 ± 10,03 e 4,43 ± 4,69, respectivamente. A taxa de recuperação foi de 32,56 ± 27,32%. Assim, conclui-se que o posicionamento caudal de portais, com ligeira triangulação, permite uma boa visualização da cavidade abdominal e facilita a manipulação dos ovários, sendo essa técnica de LapOPU viável em pacas e de fácil execução.(AU)

ADAPT(tm) trocar use for laparoscopic procedures in equidea / Utilização do trocater AdaptTM para procedimentos laparoscópicos em equídeos

O objetivo deste trabalho é descrever o uso do trocater modelo Adapt(tm) no acesso laparoscópico em animais da família dos equídeos. O procedimento cirúrgico foi realizado em 15 equídeos (quatro jumentas, seis cavalos e cinco éguas), com peso médio de 320kg (290kg e 450kg, pesos máximo e mínimo, respectivamente). Os pacientes foram mantidos em posição quadrupedal, sob sedação e bloqueio local. Primeiramente, realizou-se o preparo asséptico, e o acesso foi feito pelo flanco direito ou pelo esquerdo, dependendo da estrutura a ser visualizada. Em todos os procedimentos, foi utilizado o trocater modelo Seal AdaptTM Ports (Teleflex Medical Introduces TautTM, USA), com diâmetro de 12mm. Inicialmente se fez uma incisão de pele de aproximadamente 15mm para inserção da ponta do trocater. Este foi inserido na ferida cirúrgica, realizando-se movimentos de 180º em sentido horário e anti-horário, até atingir a cavidade abdominal. Após esta etapa, o obturador do trocater foi retirado, e a ótica inserida para confirmar o acesso à cavidade abdominal. A síntese das camadas superficiais da muscular foi realizada com fio nylon nº 0, em um padrão Sultan, e posteriormente a dermorrafia, também com nylon nº 0, no padrão de Wolf. O equipamento apresentou eficiência nos procedimentos de dissecação das camadas subcutânea, musculares e peritônio, não ocorrendo significativa hemorragia nessas camadas. Em um paciente muar, ocorreu afastamento do peritônio parietal, e em alguns casos (40%) ocorreu pequeno enfisema subcutâneo no pós-cirúrgico. Todos os pacientes apresentaram boa cicatrização da ferida cirúrgica. O trocater modelo AdaptTM mostrou-se eficiente na abordagem laparoscópica em equinos, apresentando segurança em se estabelecer o acesso e versatilidade no emprego de diversos instrumentais.(AU)

Insights into the role of cervical mucus and vaginal pH in unexplained infertility / Sobre o papel do muco cervical e do PH vaginal na gênese da infertilidade inexplicada

Unexplained infertility diagnosis is made in the presence of a normal semen analysis when tubal patency and normal ovulatory function are established. Among several potential causes, unexplained infertility could be attributed to vaginal pH and cervical mucus abnormalities. Although the vaginal canal and the cervix generally function as effective barriers to sperm, and although the production of mucus is essential to transport them from the vagina to the uterine cavity, these factors receive little attention in the investigation of couples with unexplained infertility. A substantial reduction in sperm number occurs as they transverse the cervix. From an average of 200 to 300 million sperm deposited in the vagina, only a few hundred achieve proximity to the oocyte. Given this expected high spermatozoa loss, a slight modification in cervical mucus may rapidly transform the cervix into a "hostile" environment, which, together with changes in vaginal environment and cervix structure, may prevent natural conception and be a cause of infertility. In this review, we discuss the physiological role of the vaginal pH and cervical mucus in fertility, and describe several conditions that can render the cervical mucus hostile to sperm and therefore be implicated in the pathophysiology of unexplained infertility.

RESUMO O diagnóstico de infertilidade inexplicada baseia-se na presença de espermograma normal, constatadas também permeabilidade tubária e função ovulatória normais. Entre as várias causas potenciais de infertilidade inexplicada, a presença de muco cervical e pH vaginal anormais devem ser consideradas. Embora a produção adequada de muco cervical seja essencial para o transporte dos espermatozóides da vagina para a cavidade uterina, e tanto o canal vaginal quanto o colo do útero desempenham função importante como barreira à passagem dos espermatozóides, estes fatores recebem pouca atenção na investigação de casais com infertilidade inexplicada. Uma redução substancial do número de espermatozoides ocorre à medida que estes percorrem o trato reprodutivo feminino. Partindo de cerca de 200 a 300 milhões de espermatozoides depositados na vagina, apenas algumas centenas alcançam a proximidade do oócito. Alteracões do muco cervical podem rapidamente transformar o colo do útero num ambiente hostil, que em conjunto com alterações no ambiente vaginal e da estrutura de colo do útero, podem apresentar-se condicões impedientes para a concepção natural; desse modo, convertem-se em causa de infertilidade. Nesta revisão, discutimos o papel fisiológico do pH vaginal e do muco cervical na fertilidade, descrever várias condicões que podem tornar o muco cervical hostil aos espermatozoides e, por fim analisamos como estes fatores interferem na fisiopatologia da infertilidade inexplicada.

Gonadotropin therapy in assisted reproduction: an evolutionary perspective from biologics to biotech

Gonadotropin therapy plays an integral role in ovarian stimulation for infertility treatments. Efforts have been made over the last century to improve gonadotropin preparations. Undoubtedly, current gonadotropins have better quality and safety profiles as well as clinical efficacy than earlier ones. A major achievement has been introducing recombinant technology in the manufacturing processes for follicle-stimulating hormone, luteinizing hormone, and human chorionic gonadotropin. Recombinant gonadotropins are purer than urine-derived gonadotropins, and incorporating vial filling by mass virtually eliminated batch-to-batch variations and enabled accurate dosing. Recombinant and fill-by-mass technologies have been the driving forces for launching of prefilled pen devices for more patient-friendly ovarian stimulation. The most recent developments include the fixed combination of follitropin alfa + lutropin alfa, long-acting FSH gonadotropin, and a new family of prefilled pen injector devices for administration of recombinant gonadotropins. The next step would be the production of orally bioactive molecules with selective follicle-stimulating hormone and luteinizing hormone activity.

Effect of chronic ethanol consumption in female rats subjected to experimental sepsis

The objective of this research was to evaluate the interference of ethanol consumption by female rats with cytokines involved in the sepsis process and its correlation with mortality, the main outcome of sepsis. Female Wistar rats in estrus phase were evaluated in three experiments. Experiment 1 (n=40) was performed to determine survival rates. Experiment 2 (n=69) was designed for biochemical analysis, measurement of cytokine and estrogen levels before and after sepsis, and experiment 3 (n=10) was performed to evaluate bacterial growth by colony counts of peritoneal fluid. In all experiments, treated animals were exposed to a 10% ethanol/water solution (v/v) as the single drinking source, while untreated animals were given tap water. After 4 weeks, sepsis was induced in the rats by ip injection of feces. In experiment 1, mortality in ethanol-exposed animals was delayed compared with those that drank water (48 h; P=0.0001). Experiment 2 showed increased tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and decreased interleukin-6 (IL-6) and macrophage migration inhibitory factor in septic animals exposed to ethanol compared to septic animals not exposed. Sepsis also increased TNF-α and IL-6 levels in both ethanol- and water-exposed groups. Biochemical analysis showed higher creatinine, alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase and decreased glucose levels in septic animals that were exposed to ethanol. In experiment 3, septic animals exposed to ethanol showed decreased numbers of colony-forming units than septic animals exposed to water. These results suggest that ethanol consumption delays the mortality of female rats in estrus phase after sepsis induction. Female characteristics, most probably sex hormones, may be involved in cytokine expression.

Participation of the GABAergic system in the anesthetic effect of Lippia alba (Mill.) N.E. Brown essential oil

The objective of this study was to identify the possible involvement of the GABAergic system in the anesthetic effect of Lippia alba essential oil (EO). We propose a new animal model using silver catfish (Rhamdia quelen) exposed to an anesthetic bath to study the mechanism of action of EO. To observe the induction and potentiation of the anesthetic effect of EO, juvenile silver catfish (9.30 ± 1.85 g; 10.15 ± 0.95 cm; N = 6) were exposed to various concentrations of L. alba EO in the presence or absence of diazepam [an agonist of high-affinity binding sites for benzodiazepinic (BDZ) sites coupled to the GABA A receptor complex]. In another experiment, fish (N = 6) were initially anesthetized with the EO and then transferred to an anesthetic-free aquarium containing flumazenil (a selective antagonist of binding sites for BDZ coupled to the GABA A receptor complex) or water to assess recovery time from the anesthesia. In this case, flumazenil was used to observe the involvement of the GABA-BDZ receptor in the EO mechanism of action. The results showed that diazepam potentiates the anesthetic effect of EO at all concentrations tested. Fish exposed to diazepam and EO showed faster recovery from anesthesia when flumazenil was added to the recovery bath (12.0 ± 0.3 and 7.2 ± 0.7, respectively) than those exposed to water (9.2 ± 0.2 and 3.5 ± 0.3, respectively). In conclusion, the results demonstrated the involvement of the GABAergic system in the anesthetic effect of L. alba EO on silver catfish.

Fructification phenology as an important tool in the recovery of iron mining areas in Minas Gerais, Brazil / Fenologia da frutificação como importante ferramenta na recuperação de áreas de mineração de ferro em Minas Gerais, Brasil

"Canga" is a name given to the ferruginous rocky fields that can be found in the "Quadrilátero Ferrífero" of Minas Gerais, Brazil. The endemism and species richness make them areas of special biological importance, regarded as high-priority for conservation. Nevertheless, they are being threatened by intense mining activity. Aiming to understand more about this flora, this study was performed in order to determine the maturation or dispersal period of the fruits of four Canga species, Alibertia vaccinioides K.Schum. (Rubiaceae), Coccoloba acrostichoides Cham. (Polygonaceae), Miconia sellowiana Naudin (Melastomataceae), and one probable new species of Calyptranthes Sw. (Myrtaceae). Although fruit maturation or dispersal tended to occur at the end of the dry season, some asynchrony was observed in these species, with food sources being available during most of the year. This shows that these species have the potential to attract animals the whole year round, and planting them for the recovery of iron mining areas may increase the community's self-regeneration capacity, leading to a more successful restoration process.

Canga é um nome dado para os campos rupestres ferruginosos encontrados no Quadrilátero Ferrífero de Minas Gerais. O endemismo e riqueza de espécies os tornam uma área de importância biológica especial, considerada prioritária para conservação. Além disso, tem sido submetida à intensa atividade mineradora. Este estudo objetivou determinar as épocas de maturação/dispersão de frutos de quatro espécies de ocorrência na canga, Alibertia vaccinioides K. Schum. (Rubiaceae), Coccoloba acrostichoides Cham. (Polygonaceae), Miconia sellowiana Naudin (Melastomataceae) e de uma provável espécie nova de Calyptranthes Sw. (Myrtaceae). Apesar da maturação/dispersão dos frutos ter apresentado uma tendência de ocorrer no final da estação seca, foi constatada uma assincronia do evento entre essas espécies, com disponibilidade de alimento aos animais frugívoros ao longo de grande parte do ano. O plantio dessas espécies para recuperação de áreas ferruginosas similares degradadas pela mineração poderá atrair fauna durante todas as estações, aumentando o potencial de autorregeneração da comunidade e o consequente sucesso no processo de restauração.

Protein-energy malnutrition halts hemopoietic progenitor cells in the G0/G1 cell cycle stage, thereby altering cell production rates

Protein energy malnutrition (PEM) is a syndrome that often results in immunodeficiency coupled with pancytopenia. Hemopoietic tissue requires a high nutrient supply and the proliferation, differentiation and maturation of cells occur in a constant and balanced manner, sensitive to the demands of specific cell lineages and dependent on the stem cell population. In the present study, we evaluated the effect of PEM on some aspects of hemopoiesis, analyzing the cell cycle of bone marrow cells and the percentage of progenitor cells in the bone marrow. Two-month-old male Swiss mice (N = 7-9 per group) were submitted to PEM with a low-protein diet (4 percent) or were fed a control diet (20 percent protein) ad libitum. When the experimental group had lost about 20 percent of their original body weight after 14 days, we collected blood and bone marrow cells to determine the percentage of progenitor cells and the number of cells in each phase of the cell cycle. Animals of both groups were stimulated with 5-fluorouracil. Blood analysis, bone marrow cell composition and cell cycle evaluation was performed after 10 days. Malnourished animals presented anemia, reticulocytopenia and leukopenia. Their bone marrow was hypocellular and depleted of progenitor cells. Malnourished animals also presented more cells than normal in phases G0 and G1 of the cell cycle. Thus, we conclude that PEM leads to the depletion of progenitor hemopoietic populations and changes in cellular development. We suggest that these changes are some of the primary causes of pancytopenia in cases of PEM.

Composição química e atividade antibacteriana dos óleos essenciais de cinco espécies de Eucalyptus cuItivadas em Goiás

Neste trabalho foi realizado um estudo da composição química e da atividade antibacteriana dos óleos essenciais extraídos por hidrodestilação, em aparelho de Clevenger modificado, das folhas dessecadas e trituradas de Eucalyptus cioeziana F. Mueller, E citriodora Hook, E. saligna Smith, E. grandis Hill ex Maiden, E. microcorys F. Mueller. A análise da composição química foi realizada por CG/EM e a atividade antibacteriana foi avaliada por difusão em ágar contra os microrganismos Escherichia coli O:158, E. coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Salmonella choleraeseus ATCC 10708. Os óleos essenciais de E. citriodora e E. grandis apresentaram maior efeito inibitório contra bactérias Gram negativas.

Chemical and biological investigation of Eucalyptus cloeziana, E. citriodora, E. saligna, E. grandis and E. microcorys essential oils were evaluated. The essential oils analysis were performed by GC/MS and the antibacterial activity was assayed in vitro by using the agar diffusion method against Escherichia coli O:158, E. coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Salmonella choleraeseus ATCC 10708. The essential oils of E. citriodora and E. grandis showed a major inhibitory activity against Gram negative bacteria.

Cellulose acetate as solid phase in ELISA for plague

Antigen from Yersinia pestis was adsorbed on cellulose acetate discs (0.5 cm of diameter) which were obtained from dialysis membrane by using a paper punch. ELISA for human plague diagnosis was carried out employing this matrix and was capable to detect amount of 1.3 µg of antigen, 3,200 times diluted positive serum using human anti-IgG conjugate diluted 1:4,000. No relevant antigen lixiviation from the cellulose acetate was observed even after washing the discs 15 times. The discs were impregnated by the coloured products from the ELISA development allowing its use in dot-ELISA. Furthermore, cellulose acetate showed a better performance than the conventional PVC plates.

Estudo epidemiológico dos pacientes com traumatismo da columa vertebral e déficit neurológico, internados no Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP / Epidemiological study of patients with spinal cord injuries and neurologic deficit, admitted in the Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de Säo Paulo

Os autores apresentaram estudo epidemiológico basedo na análise dos caso com lesöes traumáticas da coluna vertebral internados no Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da FMUSP de 1982 a 1987. Dos 428 pacientes 94,3% eram do sexo masculino, estando predominantemente na faixa etária de 21 a 30 anos. O nível mais freqüênte da lesäo foi na regiäo cervical, com déficit neurológico do tipo completo. Os tipos de acidente ou violência mais freqüentes foram os ferimentos por arma de fogo e a seguir os acidentes de tránsito. A freqüência de óbito foi de 21% principalmente por problemas respiratórios

Estudo duplo-cego cruzado com verapamil x placebo na cardiopatia isquêmica através do teste ergométrico / Cross double-blind study with verapamil x placebo in ischemic heart disease by ergometric test

Vinte e quatro pacientes, portadores de "angor pectoris", foram submetidos a um ensaio duplo-cego cruzado entre verapamil e placebo. A eficacia da droga pode ser avaliada atraves de esforco e de criterios clinicos. Com o uso de verapamil (360 mg/ dia), foi possivel obter uma grande reducao da frequencia de crises de angina e no consumo de nitritos sublinguais. Alem disso, houve uma significativa atenuacao de certas anormalidades do teste de esforco e uma acao benefica na pressao sanguinea e na frequencia cardiaca media. Nao foram constatados efeitos colaterais importantes durante todo o estudo